فعالية وخواص أنزيم الديوكسي رايبونيوكليز في بكتريا الزوائف الزنجارية
الملخص
تضمن البحث دراسة فعالية وخواص أنزيم الديوكسي رايبونيوكليز DNase الخارج خلوي في رائق الوسط ألزرعي لنمو بكتريا Pseudomonas aeruginosa (الزوائف الزنجارية) وكذلك فعالية الأنزيم في مستخلص هذه البكتريا. أعطى الأنزيم أفضل فعالية في خليط التفاعل الذي يحتوي على 24-18 مايكروغرام من محلول الأنزيم و 5 مايكروليتر من 0.1 مولاري من CaCl2 و100 مايكروليتر من محلول المادة الأساس المتكون من (DNA 0.18mg/ml في 8 ملي مولار صوديوم بوريت pH 8.4 يحتوي على 10 ملي مولار كلوريد الصوديوم) و100 مايكروليتر من 8 ملي مولار من المحلول المنظم صوديوم بوريت pH 8.4 .حضن الخليط بدرجة 37 O م ولمدة 30 دقيقة حيث كانت فعالية الأنزيم 4.52± 0.32 وحدة أنزيمية/سم3 في رائق الوسط الزرعي، وكانت قيمة ثابت ميكيلس – منتن (Km) مساوية إلى 1.68 × 10-4 μM ووجد ان الانزيم أعطى فعالية بوجود الـ RNA ، حيث كانت نسبة الفعالية عندما يكون الـ RNA مادة أساس هي 82% في رائق وسط نمو البكتريا و75% في رائق المستخلص الخلوي لبكترياPseudomonas aeruginosa بالمقارنة مع الفعالية عندما يكون الـ DNA المادة الأساس. كذلك وجد ان الوزن الجزيئي الظاهري لأنزيم DNase بتقنية الترشيح الهلامي تتراوح بين 36000 و48000 دالتون وان الوزن الجزيئي لـ RNase 17000 دالتون.