دراسة كيموحيوية لأنزيم الريدينيز المعزول من الدم ودوره في إزالة سمية السيانيد

تضمن البحث عزل انزيم الريدينيز من بلازما الدم إذ أظهرت الطريقة المحورة لعزل أنزيم الريدينيز من بلازما الدم على شكل بلورات نقية عدد مرات تنقية عالية مقارنة بتقنية الترشيح الهلامي المستخدمة لعزل أنزيم الريدينيز من محلول راسب كبريتات الامونيوم لبلازما الدم. وجد ان الحزمة البروتينية (A) المعزولة بتقنية الترشيح الهلامي والحزمة البروتينية (C) المعزولة من محلول راسب كبريتات الامونيوم باستخدام عمود الفصل الحاوي على (Sephadex G - 75) لهما وزن جزيئي(1000 37153 دالتون) و (1000 36307 دالتون) على التوالي. كما درست الظروف المثلى لفعالية انزيم الريدينيز المعزول من بلازما الدم الحزمة البروتينية (A) و(C) فوجد ان لهما زمن تفاعل امثل عند الدقيقة (30) و(35) وأس هيدروجيني امثل عند (pH=8) ودرجة حرارة مثلى (45C) و(50C) وكان التركيز الأمثل لمادة الأساس ثايوسلفات الصوديوم (130mM) و(125mM) ولمادة سيانيد البوتاسيوم (130mM) و(135mM). وأظهرت النتائج أن البنزالديهايد يعمل على تثبيط أنزيم الريدينيز ويمكن إزالة التثبيط جزئياً باستخدام (0.1M) ثايوسلفات الصوديوم، كما وجد انخفاض في فعالية أنزيم الريدينيز عند استبدال مادة الأساس ثايوسلفات الصوديوم بأحد الأحماض الامينية (سستين، مثيونين، سستاين). كذلك أظهرت النتائج تأثير بيتا– ميركابتو ايثانول على الخواص الجزيئية لأنزيم الريدينيز من خلال اختزاله أصرة كبريت – كبريت الموجودة في كلاً من الحزمة البروتينية (A) و(C).كما درست فعالية أنزيم الريدينيز المعزول من بلازما الدم (الحزمة A) في إزالة سمية السيانيد داخل الجسم (باستخدام حيوانات التجارب) وخارج الجسم (باستخدام الدم) إضافة الى تأثير السيانيد على عدد من المتغيرات السريرية (الكلوكوز، الهيموكلوبين، الثايوسيانيت) إذ بينت النتائج أن سيانيد البوتاسيوم يؤدي الى زيادة تركيز الكلوكوز والهيموكلوبين والثايوسيانيت داخل وخارج الجسم مقارنة بمجموعة السيطرة، بينما لوحظ أن أنزيم الريدينيز المعزول ومادة الاساس ثايوسلفات الصوديوم يعملان معاً أو على انفراد في إزالة سمية السيانيد داخل وخارج الجسم وقد ظهر ذلك من خلال انخفاض تركيز الكلوكوز والهيموكلوبين وزيادة تركيز الثايوسيانيت مقارنة بمجموعة السيطرة.