فصل ﺇنزيم اللايبيز من لب الفستق البري ودراسة ألفته تجاه بعض المثبطات خارج وداخل جسم الفئران

تضمنت الدراسة تنقية ﺇنزيم اللايبيز من نبات الفستق البري باجراء الترسيب باستخدام كبريتات الأمونيوم بتركيز 70% ثم الفرز الغشائي وكروماتوغرافيا التبادل الأيوني وأخيرا الهجرة الكهربائية. تم التوصل ﺇلى أن للإنزيم متماثلا واحدا بوزن جزيئي 43597 دالتـون وبلغت فعاليته النوعية 3-10×152 وحدة ﺇنزيمية / ملغم بروتين. بلغت أقصى فعالية للإنزيم عندpH 7.5 ودرجة حرارة 40 م. كانت السرعة القصوى Vmax التي يعمل بها الإنزيم 0.142 وحدة ﺇنزيمية / ملي لتر/ دقيقة، وأن قيمة Km بلغت 0.666 ملي مولار. تم اختبار إمكانية ونوع تثبيط ﺇنزيم اللايبيز بوجود مادتي الكويرستين روتينوسايد والميلاتونين. وقد ظهر أن نوع التثبيط هو غير تنافسي وكانت قيمة ثابت التثبيط (Ki) 1.025 و1.006 ملي مولار للمثبطين على التوالي. أختبرت، أيضا ألفة ﺇنزيم اللايبيز في مصل دم الفئران السليمة والفئران المستحدث فيها السكر بالألوكسان تجاه المادتين أعلاه ووجد أن معاملة الحيوانات بالكويرستين روتينوسايد بجرعة 523.3 مايكروغرام / كغم وزن الجسم أظهرت ﺇنخفاضا معنويا في فعالية ﺇنزيم اللايبيز في حين انخفضت فعاليته بشكل غير معنوي عند المعاملة مع الميلاتونين بجرعة 8 مايكروغرام / كغم وزن الجسم. وقد تم التوصل ﺇلى أن معاملة الحيوانات بهاتين المادتين أدت ﺇلى انخفاض معنوي في مستوى كل من الكلوكوز والكوليستيرول الكلي ونسبة الكوليستيرول الكلي/ كوليستيرول البروتين الدهني عالي الكثافة كما ارتفع مستوى كوليستيرول البروتين الدهني عالي الكثافة معنويا في مصل دم الفئران السليمة والفئران المستحدث فيها السكري. ﺇن التأثير التثبيطي للكويرستين روتينوسايد والميلاتونين تجاه ﺇنزيم اللايبيز وتأثيرهما في مستوى المتغيرات الكيموحيوية التي تناولتها الدراسة قد يساعد في اعتماد هاتين المادتين دواءاً لكونهما مثبطات طبيعية.