عزل انزیم الفوسفاتیز القاعدی من نبات الصبار Aloe Vera
الملخص
الملخصتضمن البحث عزل انزیم الفوسفاتیز القاعدی من المستخلص المائی لنبات الصبار Aloe vera باستخدام تقنیة الترشیح الهلامی.وقد تبین باستخدام تقنیة الترشیح الهلامی على عمود الفصل الحاوی على الهلام Sephadex G-100 احتواء محلول الراسب البروتینی الناتج من الترسیب بکبریتات الأمونیوم للمستخلص المائی لنبات الصبار على حزمتین بروتینیتین، وتبین امتلاک الحزمتین لفعالیة متباینة لانزیم الفوسفاتیز القاعدی، فقد أظهرت الحزمة الأولى ذات الوزن الجزیئی العالی فعالیة نوعیة عالیة للانزیم وبنقاوة بلغت (28) مرة فی حین أن الحزمة الثانیة تمتلک فعالیة نوعیة منخفضة جدا لانزیم الفوسفاتیز القاعدی. وذلک فضلا عن تحدید الوزن الجزیئی التقریبی لانزیم الفوسفاتیز القاعدی المنقى جزئیا (الحزمة البروتینیة الأولى) باستخدام تقنیة الترشیح الهلامی وکان مقداره (147353) دالتون. ثم حددت الظروف المثلى لعمل الانزیم المنقى جزئیا، وبینت النتائج أن الانزیم یعمل فی المحلول المنظم (کاربونات الصودیوم- بیکاربونات الصودیوم)عند ترکیز امثل (100ملی مولار) واس هیدروجینی امثل (9.7) ودرجة حرارة مثلى (50 مئویة) وترکیز امثل (30 ملی مولار) لمادة الفنیل فوسفات ثنائیة الصودیوم di-sodium phenyl phosphate کمادة أساس وباستخدام رسم لاینویفر-بیرک وجد أن السرعة القصوى التی یعمل بها الانزیم تساوی (185.18 وحدة أنزیمیة/100ملی لتر من المحلول البروتینی) وان قیمة ثابت مکیلیس-منتن تساوی (3.9 ملی مولار).وأشارت النتائج إلى انخفاض فعالیة الانزیم تدریجیاً إلى (76%) و (50%) من القیمة الأصیلة عند خزن الانزیم فی درجتی حرارة (4 مئویة) ودرجة حرارة الغرفة (40-30 مئویة) على التوالی مدة 30 یوما.