دراسة خصائص أنزیم بولی أمین أوکسیدیز المنقى جزئیاً من نسیج دماغ الأغنام
الملخص
تضمنت الدراسة تنقیة جزئیة لأنزیم بولی أمین أوکسیدیز من نسیج دماغ الأغنام, باستعمال الفرز الغشائی وکروموتوغرافیا التبادل الأیونی باستعمال DEAE - سلیلوز. وجد ان هناک متماثلین للأنزیم (I و II) وبفعالیة نوعیة 3.876 و 2.856 وحدة أنزیمیة/ملغم بروتین على التوالی, وبعدد مرات تنقیة 11 و 8 مرة على التوالی مقارنة بالأنزیم الخام. نظرا للفعالیة العالیة للمتماثل الاول I، فقد کان محل دراستنا, ففی دراسة الظروف المثلى للأنزیم، وجد انه بالحجم الأنزیمی 100 مایکرولیتر اعطى أعلى فعالیة, وعند اُس هیدروجینی (pH) 9، ودرجة حرارة 40°م، وعند فترة تحضین 10 دقائق. تمت دراسة بعض خصائص أنزیم بولی أمین أوکسیدیز المنقى جزئیاً ووجد ان خصوصیة الأنزیم تجاه مواد الأساس قد اعطت أعلى فعالیة عند استعمال السبرمدین.باستعمال رسم لینویفر-بیرک، لوحظ ان السرعة القصوى (Vmax) التی یعمل بها الانزیم وقیمة ثابت میکیلس (Km) بلغت 0.145 وحدة أنزیمیة/مل و43.4 ملی مولار على التوالی، وان أیون البوتاسیوم هو أکثر الأیونات تحفیزا لفعالیة الأنزیم, حیث ادت إلى تحفیز الأنزیم بمقدار 233.8 %. أشارت النتائج إلى ان المرکبات (کلورید الامونیوم وفلورید الصودیوم وفینایل هیدرازین وآزید الصودیوم و EDTA) اظهروا تأثیرا تثبیطیا واضحا على فعالیة الأنزیم وبنسبة (56.1 % و49.9% و %49.9 و 37.6% و 25%) على التوالی.