عزل وتنقیة جزئیة لأنزیم الکلوتامین سنثتیز من کالس نبات الحبة السوداء (Nigella sativa L. )
الملخص
الخلاصةاستخدم وسط موراشج وسکوک المحور والمضاف إلیه 2, 4 – D بترکیز 10-3 M لاستحداث الکالس من قطع سیقان بادرات الحبة السوداء (Nigella sativa L.). وجد أنزیم الکلوتامین سنثتیز (EC 6 . 3 . 1. 2) فی مستخلص کالس نبات الحبة السوداء وتم تنقیته جزئیاً بمقدار 37 مرة بواسطة عملیة الترسیب بکبریتات الامونیوم والفرز الغشائی وکذلک من خلال تمریره بعمود الفصل الکروماتوغرافی الحاوی على السیفادکس G – 200، ووجد ان الوزن الجزیئی للانزیم مساوٍ إلى (50000 Da) تقریباً. تم دراسة الظروف المثلى للانزیم المنقى جزئیا من الکالس وأعطى الکلوتامین سنثتیز أعلى فعالیة عند استخدام محلول الترس الحامضی بترکیز 80mM بدالة حامضیة 7.2 کمحلول (منظم) و 10mM من الکلوتامیت بوصفها المادة الأساس والتحضین بدرجة حرارة 30° C لمدة 15 min.